商品属性:
产品名称:二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)生化检测试剂盒
规格:100管/96样 50管/48样 25管/24样
货号 : EY-01S1388
测试方法:微量法 紫外分光光度法 紫外分光光度法
分类:光合作用系列
商品详情:
测定意义:
核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一个关键酶,既控制着CO2的固定,同时又制约着碳素向Calvin循环和光呼吸循环分流,其活性的大小直接影响着光合速率。
测定原理:
在Rubisco的催化下,1分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)与1分子的CO2结合,产生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA),PGA可通过外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用,产生甘油醛-3-磷酸,并使还原型辅酶I(NADH)氧化。因此,340nm吸光度的变化可计算还原型辅酶I氧化速率,还原型辅酶I氧化速率可反应Rubisco的活性。
需自备的仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取:
1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心20min,取上清置冰上待测。
2、细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);16000g, 4℃离心20min,取上清液置冰上待测。
3、血清等液体:直接测定。
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂三在25℃水浴中保温30 min。
3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL样本上清液、800μL试剂三和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A测定管=A1-A2。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上。
3、操作表:
试剂名称(μL) | 测定孔 |
样本 | 20 |
试剂二 | 760 |
试剂三 | 10 |
试剂四 | 10 |
将上述试剂按顺序加入1 mL石英比色皿中,混匀后立即在340 nm波长下记录初始吸光度A1和反应1min后的吸光度A2,计算ΔA=A1-A2。
注意:若A1-A2大于0.5,需将样本用提取液稀释,使A1-A2小于0.5,可提高检测灵敏度。计算公式中乘以相应稀释倍数。
NAD-MDH活力单位的计算:
1、血清(浆)NAD-MDH活力的计算
单位的定义:每毫升血清(浆)每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=6430×ΔA
2、组织、细菌或细胞中NAD-MDH活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-MDH(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总)÷T =6430×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总)÷T=3.215×ΔA
V反总:反应体系总体积,8×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.02mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,1 min;W:样本质量,g;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;2000:细胞或细菌总数,2000万。
公司正在销售的产品:
二氨基苯甲酸(DABA)DNA比色法定量测定试剂盒 | 大量蛋白样品液相法去内毒素试剂盒 | 品红亚培养基(远藤琼脂培养基) 规格: 250g 用途: 用于水中大肠菌群的分离或确证试验。 (GB/T8538-2008和GB5750.12—2006)。 |
铜离子膜通道转运功能(P型ATP酶)绿色荧光检测试剂盒 | 冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂盒(超氧阴离子) | 卵黄多菌素琼脂平板 规格: 90mmX20个 用途: 用于蜡样芽孢杆菌的分离培养及菌数测定。 |
组织α-L-岩藻糖苷酶(AFU)荧光定量检测试剂盒 | DNA甲基转移酶(DNMT)总活性酶连续循环比色法 | 嗜冷菌计数琼脂 250(g) incubation media 嗜冷菌计数琼脂 250(g) |
细胞PKCβ2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 细胞人类巨细胞病毒(HCMV PROTEASE)活性荧光淬灭法 | Selenite cystine enrichment btoth for microbiology 1.07709.0500 MERCK默克 incubation media Selenite cystine enrichment btoth for microbiology 1.07709.0500 MERCK默克 |
水中肠球菌(Enterococci)基因定性检测试剂盒 | JM109细菌 | 碱性胆盐琼脂 250 用于分离 incubation media 碱性胆盐琼脂 250 用于分离 |
组织N-链接硫酸酯化糖胺多糖(N-sGAG)含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比色法定量检测试剂盒 | 琼脂平板(9cm) 10个/包 用于的分离培养 | 亚碲酸盐卵黄液 Egg-Yolk Tellurite Emulsion 5ml*10 加入Baird-Parker琼脂基础中 |
通用型内质网形态染色试剂盒 | 基础 250g 用于副溶血性弧菌的溶血试验(GB标准) | 细菌琼脂粉 Bacto-Agar 250克 BR |
石蜡切片组织线粒体复合物I蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 硝胺18%甘油(DG18)琼脂 250g 用于蜂蜜中嗜渗酵母计数 | 1640培养基 RPMI 1640 10升 含L-谷酰胺,不含碳酸氢 |
细胞半胱-6(CASPASE-6)活性荧光定量检测试剂盒 | 二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)生化检测试剂盒 优级胎牛血清/Fetal bovine serum(Characterized FBS) BR 100/500毫升 国产/进口 | 西蒙氏柠檬酸盐培养基 100g 用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验 |
细菌糖酵解IMViC检测试剂盒 | 培养基/盐培养基/Malonate Broth 用于测定肠道细菌对盐的利用试验 10克 国产/进口 | 嗜热脂肪芽孢杆菌 支/瓶 |
© 2023 上海一研生物科技有限公司版权所有 沪ICP备14030958号-14 管理登陆 技术支持:化工仪器网 GoogleSitemap