J82人膀胱移行细胞癌

细胞基本属性：

细胞详细介绍：

传代培养操作步骤：

一、贴壁培养

细胞传代培养操作步骤如下：

（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。

（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。

（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的，一般应覆盖整个培养瓶底。

（4）把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化，2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察，当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时，再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，然后立即加入2倍量的培养液中止消化，使用吸头轻轻吹打，混合均匀，以防消化过度。

（5）吸出所有细胞悬液至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。

（6）弃上清，加入适量培养液重悬细胞，轻轻吹打混匀，使细胞均匀分散。

（7）用吸头吸取适量细胞悬液，以适宜的密度接种于新的培养瓶中，补足培养液，摇匀，放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。

（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间，甚至进行细胞冻存。

二、悬浮细胞

传代培养操作步骤如下：

一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法（培养液中含有细胞碎片的情况下）。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%（细胞悬液变黄）时，即可进行传代。

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LRP5： 低密度脂蛋白受体相关蛋白5抗体 615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS

HL-60人原髓细胞白血病细胞 HL-60 primary human myeloid leukemia cells IMDM(GIBCO)+20%FBS 大鼠载脂蛋白A5(apo-A5)ELISA试剂盒 IFN- Gamma (mouse) 小鼠γ干扰素 96T

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小肠隐窝上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) 大鼠载脂蛋白A5(APOA5)ELISA试剂盒 CTACK/CCL27(Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK)  人皮肤T细胞虏获趋化因子 96T

phospho-LRP1(Ser4523)： 0酸化低密度脂蛋白受体相关蛋白1抗体 小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS

J82人膀胱移行细胞癌phospho-HDAC2 (Ser394)： 0酸化组蛋白去乙酰化酶2抗体 兔主动脉平滑肌细胞;SMC 白血病细胞，L1210细胞 SH2细胞，小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞

TNFRSF17 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 TNFRSF17 / BCMA 人细胞裂解液 (阳性对照) 人抗狂犬病毒抗体(ai-RV)ELISA 试剂盒 Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原) 0.5mg

phospho-HOMER3 (Thr36)： 0酸化HOMER3蛋白抗体 人少突胶质细胞

IMR-32细胞，人神经母细胞瘤细胞 黄杆菌属 人脑血管平滑肌细胞RNAHBCSMC miRNA5 μg 人抗可提取核抗原抗体(ENA-Ab)ELISA 试剂盒 ARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受体2A/激活素受体相互作用蛋白2a抗原 0.5mg

HRAS+KRAS： 转化蛋白p21抗体 HA Others H16N3 甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

（1）严格进行无菌操作，所用一切试剂及耗材均应无菌，且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上，以免细胞发生污染。

（2）所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞，对培养液的要求不一样，必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。

（3）胎牛血清对于维持细胞生存，促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定，就应保持用至实验完成。

（4）消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少，或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离，这时的细胞已有损伤或死亡，影响细胞数量和实验进度。

（5）细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够，或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后，应先弹散细胞沉淀，再加入培养液重悬，这样比直接吹打对细胞损伤小，可以提高细胞活率。

（6）吹打细胞时应尽量避免细胞的产生，以免损伤细胞，影响细胞状态（吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生）。