HELF人胚肺成纤维细胞

细胞基本属性：

细胞详细介绍：

传代培养操作步骤：

一、贴壁培养

细胞传代培养操作步骤如下：

（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。

（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。

（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的，一般应覆盖整个培养瓶底。

（4）把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化，2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察，当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时，再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，然后立即加入2倍量的培养液中止消化，使用吸头轻轻吹打，混合均匀，以防消化过度。

（5）吸出所有细胞悬液至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。

（6）弃上清，加入适量培养液重悬细胞，轻轻吹打混匀，使细胞均匀分散。

（7）用吸头吸取适量细胞悬液，以适宜的密度接种于新的培养瓶中，补足培养液，摇匀，放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。

（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间，甚至进行细胞冻存。

二、悬浮细胞

传代培养操作步骤如下：

一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法（培养液中含有细胞碎片的情况下）。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%（细胞悬液变黄）时，即可进行传代。

公司正在出售的产品：

Phospho-FLT3 (Tyr842)： 0酸化FMS样酪酸激酶3 0.1ml

细胞角蛋白19抗体 人无色素睫状上皮细胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg

CCC-HEK-1细胞，人胚肾二倍体细胞 鼠逆转录酶病毒包装细胞,PT67细胞 CL-0398NCI-H2452(人间皮瘤细胞)5×106cells/瓶×2 兔子D二聚体(D2D)ELISA 试剂盒 IgM/PE-Cy7 PE-Cy7标记的小鼠抗兔IgM 0.1ml

Phospho-FLT3 (Tyr969)： 0酸化FMS样酪酸激酶3 0.1ml

细胞角蛋白16抗体 EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人细胞裂解液 (阳性对照)

Myotilin： 肌收缩蛋白MYOT抗体 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5

NCI-H524(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC(人脐静脉血管内皮细胞) 大鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒 sE-selectin(Human soluble E-selectin)  人可溶性E选择素 96T

phospho-MAP4K4(Ser631)： 0酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗体 tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1F3

IL1B Protein Mouse 重组小鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 大鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 试剂盒 sICAM-1(Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1)  人可溶性细胞间粘附分子1 96T

RNF59： 环指蛋白59抗体 PLK1 Others Mouse 小鼠 PLK1 / PLK-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

HELF人胚肺成纤维细胞Calu-6细胞，人退行性癌细胞 克雷伯肺炎杆菌 叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21 人大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA 试剂盒 HSP47(Heat shock protein-47) 热休克蛋白-47抗原 0.5mg

Hepatocyte(2H5)： 人肝细胞单克隆抗体 ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人细胞裂解液 (阳性对照)

杂交瘤(B类);C3110D2E11 人大内皮素(Big ET)ELISA 试剂盒 HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 热休克蛋白90α抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908

NCI-H1299(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 人大肠菌素(colicin)ELISA 试剂盒 HSP-105 (heat sock protein-105) 热休克蛋白HSP105抗原 0.5mg

Hepcidin-25： 铁调节蛋白/铁调素抗体 黑色素细胞培养基MelM

（1）严格进行无菌操作，所用一切试剂及耗材均应无菌，且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上，以免细胞发生污染。

（2）所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞，对培养液的要求不一样，必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。

（3）胎牛血清对于维持细胞生存，促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定，就应保持用至实验完成。

（4）消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少，或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离，这时的细胞已有损伤或死亡，影响细胞数量和实验进度。

（5）细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够，或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后，应先弹散细胞沉淀，再加入培养液重悬，这样比直接吹打对细胞损伤小，可以提高细胞活率。

（6）吹打细胞时应尽量避免细胞的产生，以免损伤细胞，影响细胞状态（吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生）。