传代培养操作步骤：

一、贴壁培养

细胞传代培养操作步骤如下：

（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。

（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。

（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的，一般应覆盖整个培养瓶底。

（4）把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化，2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察，当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时，再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，然后立即加入2倍量的培养液中止消化，使用吸头轻轻吹打，混合均匀，以防消化过度。

（5）吸出所有细胞悬液至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。

（6）弃上清，加入适量培养液重悬细胞，轻轻吹打混匀，使细胞均匀分散。

（7）用吸头吸取适量细胞悬液，以适宜的密度接种于新的培养瓶中，补足培养液，摇匀，放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。

（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间，甚至进行细胞冻存。

SK-MEL-5人皮肤恶性黑色素瘤细胞

细胞基本属性：

细胞详细介绍：

二、悬浮细胞

传代培养操作步骤如下：

一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法（培养液中含有细胞碎片的情况下）。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%（细胞悬液变黄）时，即可进行传代。

（1）严格进行无菌操作，所用一切试剂及耗材均应无菌，且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上，以免细胞发生污染。

（2）所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞，对培养液的要求不一样，必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。

（3）胎牛血清对于维持细胞生存，促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定，就应保持用至实验完成。

（4）消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少，或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离，这时的细胞已有损伤或死亡，影响细胞数量和实验进度。

（5）细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够，或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后，应先弹散细胞沉淀，再加入培养液重悬，这样比直接吹打对细胞损伤小，可以提高细胞活率。

（6）吹打细胞时应尽量避免细胞的产生，以免损伤细胞，影响细胞状态（吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生）。

公司正在出售的产品：

HL-7702细胞，人肝细胞正常 人干细胞因子单克隆抗体细胞株,AMS2细胞 叙利亚仓鼠皮肤细胞;GH-S1 小鼠β-内啡肽(βEP)ELISA试剂盒 SAMD9： SAMD9蛋白抗体 MMP9 Others Mouse 小鼠 MMP-9 人细胞裂解液 (阳性对照)

人角膜细胞裂解物HKL 小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒 SAMDC： S-腺苷蛋酸脱羧酶抗体 P388 小鼠白血病细胞

Promocell C-20011 Keratinocyte GrowthMedium 2, 角质细胞生长培养基2型(即用型) 500ml 小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA 试剂盒 SAP62： 剪接体相关蛋白62抗体 rCF, 大鼠心脏成纤维细胞

Lncap clone FGC(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)ELISA试剂盒 SAP97： 突触相关蛋白97抗体 人表皮黑色素细胞-深色素(HEM)( 5×105 )

C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-);LTK- 小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA 试剂盒 SAPAP3： PSD95结合蛋白3抗体 人T淋巴瘤转基因细胞;Jurkat D,E 大鼠肾小管平滑肌细胞培养基 100mL

IL-31RA/CRL3： 白介素31受体a抗体 T-109A弹性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)1mL

FGF10 Protein Human  FGF10 蛋白 大鼠脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)ELISA试剂盒 Rabbit IgG/Biotin 化兔IgG 0.1ml

LRSAM1： LRSAM1蛋白抗体 CCNE1 Others Human 人 CCNE1 / Cyclin-E1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠肠巨噬细胞培养基 100mL 大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒 mouse IgG/Biotin 化小鼠IgG 0.1ml

Limd1： LIM结构域蛋白1抗体 SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞 低转移肺癌细胞,96-C细胞 PLC/PRF/5(肝癌亚力山大细胞)

SK-MEL-5人皮肤恶性黑色素瘤细胞EL4(小鼠淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0255A875(人黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠胚胎细胞;104C1 人抗胸腺细胞球蛋白(ATG)ELISA 试剂盒 MMP-14(Matrix metalloproteinase-14) 金属基质蛋白酶-14 0.5mg

HSP70： 热休克蛋白-70抗体 人脐静脉内皮细胞(人膀胱癌细胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]

R 1610(仓鼠肺细胞) 5×106cells/瓶×2 人抗信号识别颗粒抗体(SRP)ELISA 试剂盒 GFRAlpha-1(GDNF family receptor alpha-1) GDNF家族受体α-1(抗原) 0.5mg

HSP90 alpha： 热休克蛋白90α抗体 EPHB6 Others Mouse 小鼠 EphB6 人细胞裂解液 (阳性对照)

原代骨细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml 人抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA 试剂盒 Ang- II (Angiotensin II ) 血管紧张素II抗原 0.5mg