传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
K1人甲状腺癌细胞
细胞基本属性:
产品名称 | K1人甲状腺癌细胞 | 组织来源 | 甲状腺癌 |
种属 | 人 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞规格 | 1x106cells/T25或1mL冻存管 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 K1;人甲状腺癌细胞 支原体检测 无 培养基 DMEM+10%FBS+1%双抗 培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
FAM3B/PANDER: 胰腺衍生因子抗体 RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞 Rattus
HTSMC-c 人类气管平滑肌细胞(HTSMC) 500,000cells 原代肝实质细胞特制基础培养基Many types of cells包装:500/250/100ml 兔子2(IGF-2)ELISA 试剂盒 IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的驴抗豚鼠IgG 0.1ml
FGF1: 酸性成纤维细胞生长因子抗体 CM-H048人胃粘膜上皮细胞培养基100mL
801-D (人巨细胞性肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 兔子1(IGF-1)ELISA 试剂盒 IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的驴抗豚鼠IgG 0.1ml
factor VIII: 8/第八/第八因子相关抗原抗体 大鼠脑膜细胞(RMC)(5×105)
CL-0467WPMY-1(人正常前列腺基质永生化细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠心型脂肪酸结合蛋白(FABP3)ELISA试剂盒 IAP(Human inhibitor of apoptosis) 人细胞凋亡抑制因子 96T
Phospho-MYPT1 (Ser507): 0酸化肌球蛋酸酶抗体 小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32
NCI-H358(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(肾上腺嗜铬细胞瘤细胞) 大鼠心肽(ANP)ELISA试剂盒 BMP-4(Mouse Bone morphogenetic protein 4) 小鼠骨成型蛋白4 96T
Phospho-MYPT1 (Ser668): 0酸化肌球蛋酸酶抗体 家猫肺细胞;FCA-L1
IL36G Protein Mouse 重组小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白 (His 标签) 大鼠心0脂抗体IgA(ACA IgA)ELISA试剂盒 Plant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 植物25羟基维生3 96T
K1人甲状腺癌细胞Phospho-HSL (Ser660): 0酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体 THY1 Others Mouse 小鼠 THY1 / CD90 人细胞裂解液 (阳性对照)
犬肾细胞;MDCK/IgR 人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)ELISA 试剂盒 Ezrin/Radixin 埃兹蛋白(多肽) 0.5mg
HURP: 肝癌上调蛋白抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9402
MA-782(小鼠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)ELISA 试剂盒 F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白(N端多肽) 0.5mg
Hrasls3: HRAS样抑制因子3抗体 胎牛血清FBS
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