hESC(H9)人胚胎干细胞
细胞基本属性:
产品名称 | hESC(H9)人胚胎干细胞 | 组织来源 | 人胚胎干细胞 |
种属 | 人 | 生长特性 | 贴壁生长 |
背景简介 | hESC(H9)细胞株来源于人胚胎干细胞,贴壁生长,呈克隆状,可在hESC/iPSC培养基中快速增殖,而边缘分化的细胞则在该培养基中生长较慢,从而选择性扩增并获得高纯度人多能干细胞。包装规格为1mL冻存管,含量为>1x106个/mL,且支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。 | 细胞形态 | 克隆状细胞样 |
STR位点 | D5S818: 11,12;D13S317: 9;D7S820: 9,11;D16S539: 12,13;vWA: 17;THO1: 9;Amelogenin: X;TPOX: 10,11;CSF1PO: 11。 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 hESC;H9;人胚胎干细胞 细胞代数 10代以内 细胞规格 1x106cells/T25或1mL冻存管 支原体检测 无 保藏机构 中国科学院分子细胞科学创新中心 培养基 hESC/iPSC细胞培养试剂盒 培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
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细胞色素P450单氧化酶抗体 615小鼠肺癌瘤株;HP615 小鼠膀胱上皮细胞培养基 100mL
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C14orf94: 14号染色体开放阅读框94抗体 NGF Others Human 人 β-NGF / Beta-NGF CHO细胞裂解液 (阳性对照)
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HDDC3: 四0酸鸟苷水解酶抗体 婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-4 白血病原髓细胞,HL-60细胞 Dami(巨核细胞白血病细胞)
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