传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
HNEPC人鼻粘膜上皮细胞
细胞基本属性:
产品名称 | HNEPC人鼻粘膜上皮细胞 | 组织来源 | 鼻粘膜 |
种属 | 人 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞规格 | 1x106cells/T25或1mL冻存管 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 HNEPC;人鼻粘膜上皮细胞 支原体检测 无 培养基 90%RPMI-1640+10%FBS 培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
SELPLG Others Human 人 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人细胞裂解液 (阳性对照) 兔基质金属蛋白9(MMP-9)ELISA试剂盒 Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗大鼠IgG 0.1ml
phospho-FXYD1 (Ser83): 0酸化0酸神经膜抗体 人脑血管平滑肌细胞RNAHBCSMC miRNA5 μg
EJ细胞,人膀胱癌细胞 小鼠成纤维细胞系,McCoy细胞 人少突胶质细胞 兔肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 试剂盒 Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗大鼠IgG 0.1ml
Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463): 0酸化碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体 TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人细胞裂解液 (阳性对照)
人脐动脉平滑肌细胞 兔环0酸腺苷(cAMP)ELISA 试剂盒 Goat Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗大鼠IgG 0.1ml
B16-F10小鼠皮肤黑色素瘤细胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培养基+10%FBS 大鼠微管关联蛋白τ(MAPτ)ELISA试剂盒 TGF- Alpha(Human transforming growth factor Alpha) 人转化生长因子α 96T
Phospho-MKP1 (Ser318): 0酸化原活化蛋白激酶0酸酶1抗体 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0239U-937(人组织细胞淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠微管关联蛋白4(MAP4)ELISA试剂盒 N-AChR 大鼠型乙酰受体 48T96T
Metabotropic glutamate receptor 2: 促代谢型谷酸受体2抗体 tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-3E5
PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞) 大鼠微管蛋白β3(TUBB3)ELISA试剂盒 ODF(Mouse osteoclast differentiation factor) 小鼠破骨细胞分化因子 96T
HNEPC人鼻粘膜上皮细胞Involucrin: 囊包蛋白/内披蛋白抗体 SCARB2 Others Mouse 小鼠 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9 人补体片段3c(C3c)ELISA 试剂盒 LH(Luteinizing Hormone) 促黄体生成素抗原 0.5mg
Insulin Receptor R: 胰岛素受体相关受体抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1002
OP9(小鼠骨髓基质细胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD8B / P37 / LEU2 人细胞裂解液 (阳性对照) 人补体片段3b受体(C3bR)ELISA 试剂盒 LH(Luteinizing Hormone) 人促黄体生成素(多肽) 0.5mg
INCA1: INCA1蛋白抗体 人脐带间充质干细胞HUMSC
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