传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
IMR-32人神经母细胞瘤细胞
细胞基本属性:
产品名称 | IMR-32人神经母细胞瘤细胞 | 年龄性别 | 男 |
种属 | 人 | 组织来源 | 神经母细胞瘤,大脑 |
细胞形态 | 成纤维状细胞样 | 生长特性 | 贴壁细胞 |
生物安全等级 | 1 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 IMR 32; IMR32; Institute for Medical Research-32; GM03320 背景简介 IMR-32细胞是由W·W·Nichols、J·Lee和S·Dwight于1967年4月从一位13个月大的男婴下腹部肿瘤中分离建系。诊断认为是神经母细胞瘤,并有少部分区域的器质性分化。IMR-32细胞包括两种类型的细胞:主要的是小的神经母细胞样的细胞;另一种是大的透明成纤维样细胞。IMR-32细胞提交到ATCC时已经传到第36代,已经证明细胞可以传代培养到80代以上。 STR位点 Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:9;D16S539:8;D18S51:12,15;D19S433:14,15;D21S11:30,31;D2S1338:23,24;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:9,10;D8S1179:13;FGA:21,24;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:15; 细胞规格 1x106cells/T25或1mL冻存管 支原体检测 无 保藏机构 ATCC; CCL-127 BCRC; 60014 BCRJ; 0377 DSMZ; ACC-165 ECACC; 86041809 培养基 MEM+10%FBS+1%Glutamax+1%NEAA+1%双抗 培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
GALNT10: 多肽N-乙酰基半乳糖转移酶10抗体 小鼠骨髓间充质肝细胞(MMSC-bm)(5×105)
人肾皮质上皮细胞总RNAHRCEpiC NA 人肿瘤特异性抗原(TSA) ELISA 试剂盒 IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的小鼠抗人IgG 0.1ml
GALNT11: 多肽N-乙酰基半乳糖转移酶11抗体 杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6 小鼠脉络膜血管细胞培养基 100mL
CD28 Others Human 人 CD28 / TP44 人细胞裂解液 (阳性对照) 人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)ELISA 试剂盒 IgG/APC APC标记的小鼠抗人IgG 0.1ml
GALNT12: 多肽N-乙酰基半乳糖转移酶12抗体 人虹膜色素上皮细胞cDNAHIPEpiC cDNA
IgG2b Others Mouse 小鼠 IgG2b-Fc 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠酶2(CA-2)ELISA 试剂盒 IL-2(Human Interleukin 2) 人白介素2 96T
Nck1: NCK衔接蛋白1抗体 台盼蓝TB
OP9小鼠骨髓基质细胞 OP9 mouse bone marrow somal cells a-MEM培养基+20%FBS 大鼠酶(CA)ELISA试剂盒 cath-K 大鼠组织蛋白酶K 96T
alpha Internexin: α-中连蛋白抗体 KLK11 Others Human 人 KLK11 / Kallikrein-11 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0111HL-7702(人肝正常细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠酶(CA)ELISA 试剂盒 CR(Mouse Calretinin) 小鼠钙结合蛋白 96T
IMR-32人神经母细胞瘤细胞ICA1: 胰岛细胞自身抗原1抗体 CM-H055人卵巢上皮细胞培养基100mL
EAC细胞,小鼠艾氏腹水癌细胞 R 1610(中国仓鼠体细胞) 鲤鱼尾鳍细胞;YZ16 人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 试剂盒 NTCP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide) 离子/磺胆酸共转运蛋白抗原 0.5mg
Islet 2: 胰岛素基因增强结合蛋白2抗体 OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人细胞裂解液 (阳性对照)
人绒癌细胞;JEG-3 人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA 试剂盒 Ghrelin 28 脑肠肽28 0.5mg
IL-16: 白介素-16抗体 人神经母细胞瘤细胞;SH-SY5Y
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