传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
XWLC-05云南宣威肺腺癌细胞系
细胞基本属性:
产品名称 | XWLC-05云南宣威肺腺癌细胞系 | 组织来源 | 肺癌 |
种属 | 人 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞规格 | 1x106cells/T25或1mL冻存管 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 XWLC-05;云南宣威人肺腺癌细胞系 支原体检测 无 培养基 90%RPMI-1640+10%FBS 培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
CL-0196RKO(人结肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 人结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 试剂盒 FITC FITC标记的兔抗亲和素 0.1ml
GIRK2: G蛋白激活内流通道蛋白2抗体 A-375 [A375], 人恶性黑素瘤细胞株 Human
HUF Pellet 人子宫成纤维细胞团块 > 1 mio.cells 人淋巴内皮细胞裂解物HLECL 人结合蛋白2(IGFBP2)ELISA 试剂盒 AP 碱性0酸酶(AP)标记的兔抗亲和素 0.1ml
GRB10: 生长因子受体结合蛋白10抗体 人急性T淋巴细胞性白血病细胞;I 2.1(CRL-2572)
AML-193(人急性单核细胞白血病单核细胞) 5×106cells/瓶×2 人结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 试剂盒 Gold 胶体金标记的兔抗亲和素 2ml
小鼠肾动脉内皮细胞培养基 100mL 大鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒 ACV-A(Human Activin A) 人活化素A 96T
Phospho-NFKBIA (Tyr42): 0酸化IKB α抗体 Mv.1.Lu细胞,貂肺上皮细胞 人结肠癌细胞,CW-2细胞 CM-H093人颅盖造骨细胞培养基100mL
TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠肾损伤分子1(Kim1)ELISA试剂盒 NRG-1(human Neuregulin 1) 人神经调节蛋白1 96T
phospho-NFKBIA(Tyr305): 0酸化IKB alpha抗体 狗间充质干细胞-脂肪DMSC-ad
WEHI-231小鼠B淋巴细胞 WEHI-231 B lymphocyte in mice DMEM+10% FBS+0.05mM β-Mercaptoethanol 大鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA 试剂盒 CXCL16 大鼠CXC趋化因子配体16 96T
XWLC-05云南宣威肺腺癌细胞系IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人细胞裂解液 (阳性对照) 人preptin ELISA 试剂盒 SSTR5 (somatostatin receptor 5) 受体5抗原 0.5mg
Interferon alpha 6: 干扰素α6抗体 牛肾细胞;MDBK
RH-35细胞,大鼠肝癌细胞 HeLa(细胞) EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1036 人PL7抗体/抗苏酰NA合成酶(PL7)ELISA 试剂盒 STAT1(signal transducers and activators of transcription 1) 信号转导与转录激活因子1抗原 0.5mg
CD18: 整合素β2/Integrin β2抗体 EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 / EFL2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人胚肾细胞;293 [HEK-293] 人PL12抗体/抗酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA 试剂盒 phospho-STAT1(p-Tyr701) peptide 0酸化信号转导与转录激活因子1抗原 0.5mg
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