传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
HPASMC人肺动脉平滑肌细胞
细胞基本属性:
产品名称 | HPASMC人肺动脉平滑肌细胞 | 组织来源 | 肺 |
种属 | 人 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
细胞规格 | 1x106cells/T25或1mL冻存管 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 HPASMC;人肺动脉平滑肌细胞 支原体检测 无 培养基 DMEM/F-12+10%FBS+0.01 mg/ml胰岛素+10ng/ml BFGF+1%双抗 培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
MB-271细胞,人癌细胞 中国仓鼠肾细胞(二氢还原酶缺陷型),CHO/dhFr-细胞 角膜上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) 人胰岛素受体β(ISR-β)ELISA 试剂盒 Cy7 Cy7标记的兔抗亲和素 0.1ml
phospho-GCN2 (Thr667): 0酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗体 CES2 Others Mouse 小鼠 CES2 / Carboxylesterase-2 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0188QGY-7701(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2 人胰岛素(INS)ELISA 试剂盒 PE PE标记的兔抗亲和素 0.1ml
Phospho-Gab1 (Tyr627): 0酸化接头蛋白Gab 1抗体 A549/DDP, 人肺腺癌耐药细胞株 Human
NHEM.f Pellet 正常人表皮黑素细胞团块(少年者) > 1 mio.cells 人肠平滑肌细胞裂解物HISMCL 人胰岛淀粉样多肽(IAPP)ELISA 试剂盒 Cy3 Cy3标记的兔抗亲和素 0.1ml
IL12B Protein Mouse 重组小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 大鼠肾素(REN)ELISA试剂盒 ANP(Human Atrial Natriuretic Peptide) 人心肽 96T
NFKB p52: 细胞核因子/k基因结合核因子 p52/p100抗体 CDKL2 Others Human 人 CDKL2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠肾动脉平滑肌细胞培养基 100mL 大鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒 SCF/MGF(Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor) 小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子 96T
Phospho-NFKB2(Ser866+Ser870): 0酸化细胞核因子/k基因结合核因子p100抗体 MDCK细胞,狗肾细胞 人结肠癌细胞,RKO细胞 CM-H101新生儿表皮角化细胞培养基100mL
NAALADL1 Others Mouse 小鼠 NAALADL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA 试剂盒 SDF-1 Beta/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1 Beta) 小鼠基质细胞衍生因子1β 96T
HPASMC人肺动脉平滑肌细胞人肾动脉平滑肌细胞培养基 100mL 人P21蛋白(P21)ELISA试剂盒 STAT6(signal transducers and activators of transduction 6) 信号转导和转录激活因子6抗原 0.5mg
IRS1: 胰岛素受体底物-1抗体 白鲢尾鳍细胞系;SCF 人成纤维细胞,Hs 578T细胞 Acc-3(涎腺腺样囊性癌细胞)
IGSF8 Others Mouse 小鼠 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 人P16蛋白(P16)ELISA试剂盒 SULT1E1(Estrogen Sulfotranferase) 雌激素转移酶抗原 0.5mg
IRS-2: 胰岛素受体底物-2抗体 水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)
F9细胞,小鼠畸胎瘤细胞 A549 [A-549](肺癌细胞) 人癌细胞;MDA-MB-453 人OJ抗体/抗异亮酰NA合成酶抗体(OJ/IleRS)ELISA 试剂盒 SUMO 类泛素蛋白 0.5mg
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