传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
UMR-106大鼠骨肉瘤细胞
细胞基本属性:
产品名称 | UMR-106大鼠骨肉瘤细胞 | 组织来源 | 器官:骨骼; 品系:Sprague-Dawley; 疾病:骨肉瘤 |
种属 | 大鼠 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
支原体检测 | 无 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 UMR 106; UMR106;大鼠骨肉瘤细胞 背景介绍;UMR-106细胞是注射放射性同位素磷(32P)诱导产生的可移植性大鼠骨肉瘤克隆建立了UMR-106细胞株。细胞对PTH,前列腺素及破骨甾体有响应。对PTH的响应度,UMR-106比相关细胞株UMR-108(ATCC CRL-1663)要高。蛋白激酶C的活化抑制ATP诱导的胞内钙水平的升高。 生物安全等级;1 细胞规格;1x106cells/T25或1mL冻存管 支原体检测;无 保藏机构;ATCC; CRL-1661 ECACC; 90111314 培养基;90%DMEM-H+10%FBS 培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit 仓鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Rat growth hormone releasing hormone (GRH) ELISA Kit 大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA试剂盒
CLIAKitforColIV(MouseCollageypeIV)ELISAKIT小鼠Ⅳ型胶原规格:48T/96T
细胞乙酰乙酰转移酶(ACAT)活性荧光定量检测试剂盒20次
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素标记二抗DAB显色试剂盒10次
周期素D3抗体
海马钙蛋白样4多肽抗体
三号染色体开放阅读框抗体
ND4L抗体
线粒体裂变因子MFF抗体
半乳糖凝集素9抗体
磷酸化叉头蛋白家族抗体
CTBS蛋白抗体
UMR-106大鼠骨肉瘤细胞氧固醇结合蛋白样3抗体
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