传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
LLC-WRC 256大鼠腹水癌细胞
细胞基本属性:
产品名称 | LLC-WRC 256大鼠腹水癌细胞 | 组织来源 | 腹水 |
种属 | 大鼠 | 生长特性 | 悬浮生长 |
细胞代数 | 10代以内 | 细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生物安全等级 | 1 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 Walker/LLC-WRC 256; Walker-256; Walker-Ca.256; Walker 256; W256;大鼠腹水癌细胞 背景简介;LLC-WRC-256细胞注入大鼠腹腔能快速形成腹水瘤,是研究抗肿瘤药物体内模型的材料。 细胞规格;1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 支原体检测;无 保藏机构;ATCC; CCL-38 ECACC; 87061101 培养基;RPMI-1640+10% FBS+PS 培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
HumaNFrelatedactivationinducedcytokine,ANCEELISAKit人坏死因子相关激活诱导因子(ANCE)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanProteinuria,UPELISA试剂盒人尿蛋白(UP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒 ,英文名: LTE4 ELISA Kit
Mouse beta glucosidase (beta -glucosidase) ELISA Kit 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠胃泌素(mouse Gasin) 48T/96T 进口分装
ELISAKi-4小鼠神经营养因子4规格:48T/96T
HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORsELISAKit人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人落叶型天疱疮抗体(PF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠醇结合蛋白(RBP)免疫试剂盒 Mouse Retinol-binding protein,RBP ELISA Kit
番茄特定基因序列PG)检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforSEP1(Humanselenoprotein1)ELISAKit人硒蛋白1规格:48T/96T
素真菌/酵母细胞蛋白结合凝胶迁移电泳分析试剂盒20次
ELISAKitKLK1人1规格:48T/96T
大鼠血管紧张素1-7(ANG 1-7)ELISA试剂盒 ,英文名: ANG 1-7 ELISA Kit
人白色念珠菌(C.albicans)ELISA检测试剂盒HumanCandidaAlbicans,C.albicansELISAKit 96T/48T
周期素依赖性激酶7抗体
毒素抗体
三羟酰脱氢酶抗体
NF-kappa-B抑制子beta抗体
腺病毒5结合蛋白BS69/骨形态发生蛋白受体相关分子1抗体
胞浆型磷脂酶A2抗体
磷酸化蛋白激酶C(T410)抗体
C型钠利尿多肽抗体
LLC-WRC 256大鼠腹水癌细胞液泡蛋白分选蛋白4B抗体
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