商品属性：

背景：

血管内皮生长因子，又称血管通透性因子（VPF）和血管内皮生长因子-A，是胎儿和成人血管生成和血管形成的有效介质，是血小板衍生生长因子（PDGF）/血管内皮生长因子（VEGF）家族的成员，通常以二硫键连接的同源二聚体形式存在。VEGF-A蛋白是一种糖基化的有丝分裂原，专门作用于内皮细胞，具有多种效应，包括介导增加血管通透性，诱导血管生成、血管生成和内皮细胞生长，促进细胞迁移、抑制细胞凋亡和肿瘤生长。VEGF-A 蛋白也是一种血管扩张剂，能增加微血管的通透性，因此初被称为血管通透因子。

标记：

1.将细胞培养基与EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU标记培养基。

2.提前将2×EdU标记培养基预热，然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合，获得1×EdU溶液。

【注】：①不建议替换全部培养基，这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜。

3.孵育细胞2 h，弃培养基。

【注】：①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。

4.以1xPBS清洗细胞两次，每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。

【注】：对于贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。

实验步骤：

1. 将细胞以 104-105 个细胞/孔的密度接种在 96 孔板 中，加入 100μL 培养基，含或不含待测化合物。在 CO2 培养箱中在 37℃ 下培养细胞 24 小时。

2. 向板中加入 10μL 不同浓度的待测物质。

3. 在培养箱中将培养板培养适当时间（如 6、12、24 或 48 小时）。

4. 向板的每个孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要将气泡引入孔中。

5. 将平板在培养箱中孵育 1-4 小时。

6. 在读板之前，在定轨振荡器上轻轻混匀。

7. 使用酶标仪测量 450nm 处的吸光度。

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