产品背景:
Noggin 是一种 46.2 kDa 的生物活性:蛋白,以二硫键连接的同源二聚体形式存在(每条链 23.1 kDa)。Noggin 可与转化生长因子-β(TGF beta)超家族信号蛋白(如骨形态发生蛋白-4(BMP-4))结合,使其失去活性:。作为 BMP 蛋白的细胞外拮抗剂,Noggin 参与了许多人体组织的发育,包括神经组织、肌肉和骨骼。此外,Noggin 还能通过与 GDF5 的相互作用抑制软骨细胞的分化。
产品名称 | 重组人Noggin蛋白(Noggin) |
英文名称 | Human Noggin protein |
货号 | EY-01X8679 |
产品规格 | 5 μg/20 μg/100 μg/1 mg |
有效期 | 12个月 |
保存 | -20ºC避光 |
产品特点:
更简单:无需抗原抗体反应,基于小分子化学反应的检测方法简单高效,反应仅需要几分钟。
更灵敏:无需抗体,检测染料仅BrdU抗体的1/500,很容易扩散,即便是单个增殖细胞也能准确检测。
更快速:无需过夜,省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤,完成整个检测周期仅需2.5小时。
更准确:无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免变性带来的样品损伤,确保细胞核边缘清晰完整。
更兼容:对样品几乎无损伤,更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记,能够同时检测细胞其他性状特征
实验步骤:
1.细胞培养
(以6孔板为参考,其他培养孔可根据实验需要进行适当调整。)每孔1x10^5-3x10^6细胞接种于6孔板中,培养至正常生长阶段。
注:细胞接种量,可根据细胞大小、生长速度、以及实验处理周期等调整。
2.细胞干预或者处理
(选做)可以根据实验需要对细胞进行药物或者其他刺激干预处理。
3.细胞共孵育培养
根据预实验结果,用细胞培养基按比例稀释溶液,或者按比例在孔板培养液中加入适量的溶液与细胞共同孵育,同时设置不添加组作为阴性对照组。每孔加入配制的稀释后的培养液共同孵育2h,去除旧培养液。
注意事项:
1.由于使用96孔板进行检测,如果你的细胞要养48 h或更长,建议不要吝啬96-孔板的四周边孔,这32个边孔不能使用,建议加入灭菌PBS以饱和中间64个孔的水分。因为细胞培养过程中,边孔的水分蒸发很快,培养液及里面的药物会出现浓缩现象,细胞的状况就复杂了。
2.溶剂在低温情况下会凝固,使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3.一般4ºC避光保存两周内有效,保存在-20度长期保存,避免反复冻融,小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解,尤其当变为灰绿色时就不能再用了。
4.Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。
5.孵育时,须避光。
6.有致癌性,用的时候小心,有条件带那种透明的簿膜手套。配成的需要无菌,对菌很敏感。
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