商品属性:
产品名称 | 重组小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF) | 英文名称 | Mouse M-CSF protein |
规格 | 5 μg/20 μg/100 μg/1 mg | 货号 | EY-01X8671 |
运输条件 | 蓝冰运输 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
背景:
巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)是一种 19.02 kDa 的造血生长因子,含有 162 个氨基酸残基。该蛋白的活性:形式为同源二聚体,由成骨细胞分泌。M-CSF 可控制单核细胞、巨噬细f胞和骨髓祖细胞的生成、分化和功能。M-CSF 能够通过结合其受体 CSF-1R 激活 CSF-1 信号通路。
标记:
1.将细胞培养基与EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU标记培养基。
2.提前将2×EdU标记培养基预热,然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合,获得1×EdU溶液。
【注】:①不建议替换全部培养基,这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜。
3.孵育细胞2 h,弃培养基。
【注】:①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。
4.以1xPBS清洗细胞两次,每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。
【注】:对于贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。
实验步骤:
1. 将细胞以 104-105 个细胞/孔的密度接种在 96 孔板 中,加入 100μL 培养基,含或不含待测化合物。在 CO2 培养箱中在 37℃ 下培养细胞 24 小时。
2. 向板中加入 10μL 不同浓度的待测物质。
3. 在培养箱中将培养板培养适当时间(如 6、12、24 或 48 小时)。
4. 向板的每个孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要将气泡引入孔中。
5. 将平板在培养箱中孵育 1-4 小时。
6. 在读板之前,在定轨振荡器上轻轻混匀。
7. 使用酶标仪测量 450nm 处的吸光度。
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