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磷酸丙糖异构酶(TPI)生化检测试剂盒

型 号

产品时间2023-09-04

所属分类糖酵解系列

报价

产品描述:磷酸丙糖异构酶(TPI)生化检测试剂盒磷酸丙糖异构酶是重要的糖酵解酶,广泛存在于动植物及微生物体内,在机体内参与糖代谢,在糖酵解,糖异生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代谢中都发挥着重要作用。

产品概述

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产品名称

规格

货号

磷酸丙糖异构酶(TPI)生化检测试剂盒

100/96 50/48   

EY-01S1169

 

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测定意义

磷酸丙糖异构酶是重要的糖酵解酶,广泛存在于动植物及微生物体内,在机体内参与糖代谢,在糖酵解,糖异生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代谢中都发挥着重要作用。

测定原理

磷酸丙糖异构酶将磷酸二羟丙酮转化为3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛与NAD3-磷酸甘油醛脱氢酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH340nm处的吸光度变化反映了磷酸丙糖异构酶的活性的高低。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)。

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试剂一:液体×1瓶,室温保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。              

试剂三:粉剂×2瓶,-20℃保存。临用前加入22mL试剂二,现配现用。

试剂四:液体×1支,4℃保存。

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1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心20min,取上清置冰上待测。

2、细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);16000g, 4℃离心20min,取上清液置冰上待测。

3、血清等液体:直接测定。

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(1)按照蛋白浓度计算

活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(Cpr×V样)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照样本质量计算

活性单位定义:25℃中每克组织每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。

ADH (nmol/min/g鲜重) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(W×V样÷V样总)÷T

=1608×△A÷W

(3)按细胞数量计算

活性单位定义:25℃中每104个细胞每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反总×109)÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

=1608×△A ÷细胞数量13.png

(4)按液体体积计算

活性单位定义:25℃中每毫升血清每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷V样÷T

=1608×△A

ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1 cm;V反总:反应体系总体积,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V样:加入反应体系中上清液体积,100μL=0.1 mL;T:反应时间,1min。

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