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1.亮发光杆菌株筛选结果

经过 7 个月的驯化培养，pH 3.0 和 pH 2.5 的酸性固体培养基上经涂布有菌落生长，pH 2.0 的固体培养基上没有观察到菌落；乳酸浓度为 6%和 8% 固体培养基上有菌落生长，浓度为 10%乳酸的平板上没有生长菌落；琥珀酸浓度为 4%、6%和 8% 的固体培养基上有菌落生长，琥珀酸浓度为 10% 的固体培养基上没有菌落生长。经显微镜观察，初步确定出 6 株耐酸菌株。为了更确定地比较 6 株菌的耐酸性能，将这 6 株菌株分别涂布在 pH 3.0、6% 乳酸和 6%琥珀酸的酸性平板上。编号为 WJ-2 的菌株在这 3 种条件下的菌落数zui多，因此选其作为目的菌株并对其进行下一步研究。

2. 菌株鉴定结果

耐受低 pH 值、高浓度乳酸和琥珀酸的菌株 WJ-2 在 pH 3.0 的 YEPD 固体培养基上培养 2 d 后形成的菌落呈椭圆形或卵圆形，乳白色，表面隆起，边缘整齐，表面光滑，无光泽，质粒粘稠。经扫描电镜观察，10 000 倍放大倍数电镜结果显示菌体呈现卵圆形或者椭圆形，经测量其长×宽平均为 3.00 μm×1.75 μm；参照酵母菌株 Saccharomyces cerevisiae YSG50 电镜结果平均为长×宽为 4.5 μm× 3.5 μm 。耐受菌株 WJ-2 比 YSG-50 的尺寸小。18S rDNA 鉴定结果分析显示，WJ-2 的 18S rDNA 共 1 450 bp，与 Saccharomyces cerevisiae 的相似度达到 99%以上，使用 MEGA 5 软件，采用 Neighbor-Joining 方法，构建系统发育树，分支左侧的数值为聚类的置信度(%)，该发育树的构建表明耐酸菌株与酿酒酵母 耐酸菌的亮发光杆菌落形态 Figure 2 The morphology of WJ-2 on the acidic plate (Saccharomyces cerevisiae)的亲缘关系zui近，分支置信度 63%，且由于菌株与菌株 Saccharomyces cerevisiae (JQ585703.1)具有zui高的相似性 85%，结合菌落形态观察结果可认为所得菌株为一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。

3. 耐酸菌株WJ-2与对照菌株YSG-50生长曲线的比较

耐酸菌株 WJ-2 与对照菌株 YSG-50 在 pH 6.0 的培养条件下其生长曲线基本重合，表明两株菌株在 pH 6.0 的条件下生长速率差别不大。pH 3.0 的培养条件对于耐酸菌株 WJ-2 的生长速率影响较小，但是对于 YSG-50 表现出明显的抑制作用，表明耐酸菌株 WJ-2 的耐酸能力明显高于 YSG-50。

4. 耐酸菌株zui适生长温度，耐酸菌株WJ-2在培养温度为30 °C 时菌体的生长速率zui快且生物量zui大。在其他温度下菌株的生长温度都有不同程度的下降。尤其在温度达到40 °C时，菌株生长受到了强烈的抑制，可能由于维持亮发光杆菌株生长必需的关键酶活性在该温度下受到了抑制，进而导致菌株生长缓慢。