elisa检测试剂盒标本收集保留不妥致细菌污染，菌体中也许富含内源性HRP，会发生假阳性反响；标本在冰箱中保留时刻过长致使血清IgG聚合，易使间接法的实验本底加深。因而，标本宜在新鲜时检查。
ELISA试剂盒实验在必定温度下的反响时刻并不是反响的结尾，温育时刻过短、温度过低，易致显色不全；温育时刻过长、温度过高，易致非特异性紧附于反响孔周围，难以清洁*，发生阴性高值或假阳性反响。要严厉按规则的温度和温育时刻进行。
假如参加的酶物过多或加在较高的孔壁上或孔口，也会致使本底添加或假阳性。水浴箱门，严厉控制水浴的温度为37±0.5。同时，微孔板不可堆叠放置，以确保传热均匀，各板的温度都能敏捷到达平衡。
当标本收集保留不妥发生溶血时，红细胞中的血红蛋白释放到血清中，血红蛋白具有过氧化物酶的性质，其通过吸附或“PP效应"（蛋白质间相互吸附的景象）后，可催化A、B液显色而形成假阳性。
因为试剂盒一般设定的反响温度为37度，在这个温度下温育必定时刻，蒸腾的水分会许多，关于全部反响系统来讲，各种反响物的浓度会不断地添加，这么必会致使反响zui终的值添加。
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