1加样
对于间接载脂蛋白elisa检测试剂盒标本一般都要进行稀释，如果加样不准就会造成误差，尤其当稀释倍数大时，很小的误差，会导致较大的相对误差，使阴性(或弱阳性)标本呈阳性(或阴性)。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。目前，大部分血站都已使用全自动酶免加样系统处理标本，可较好地避免以上误差
2洗涤
在ELISA中正确的洗涤是保证得到可重复结果的关健一步，应引起操作者重视。无论是手工操作还是机器操作，得出不正确的结果常与不正确的洗涤有关，ELISA就是靠洗涤来达到分离游离和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以消除残留在板孔中没能与固体抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。
3 温育
每种试剂都有其*反应模式，其中温度和温育时间控制是重要因素。因孵育温度高，反应时间长，会造成整板本底高，阳性率高。温育一般用湿盒或水浴 ，反应板不宜叠放，以保证各板温度都能迅速平衡，为避免蒸发，板上应加盖。
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