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    人血管平滑肌细胞的贴壁生长和悬浮生长细胞处理方法

    点击次数:1073  更新时间:2021-01-26
       人血管平滑肌细胞的贴壁生长和悬浮生长细胞处理方法:
      贴壁生长的细胞:
      1、贴壁生长的细胞用T25细胞培养瓶发货,收到细胞后,拆开自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。
     
      2、消毒后用显微镜观察细胞状态,并拍下细胞照片。
     
      3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。
     
      4、平衡后将T25瓶中培养基吸出用离心管装好备用。
     
      5、如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6mL培养基放回培养箱继续培养即可。
     
      悬浮生长的细胞:
      1、悬浮细胞发货复苏后用离心管发货,拆开包装离心管的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。
     
      2、然后用显微镜观察细胞状态。
     
      3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上。
     
      4、平衡完成后,离心收集细胞,弃上清。
     
      5、用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。
     
      人血管平滑肌细胞的培养步骤:
      1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL*培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜,培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
     
      2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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