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    鸡减蛋综合征病毒PCR检测试剂盒使用方法

    点击次数:475  更新时间:2021-04-07

    鸡减蛋综合征病毒PCR检测试剂盒使用方法:

    一、样品 RNA 的制备
    1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司的一管式病毒 RNAout
    2、或柱式病毒 RNAout。
    二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
    1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
    2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
    3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
    反应终体积为 20μL。
    4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
    5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。

    样本采集、存放及运输:
    1、费用样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
    2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(多冻融3次);
    3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。

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