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    在植物ELISA试剂盒实验中,选择好各项ELISA实验条件是很重要的

    点击次数:449  更新时间:2022-11-22
      植物ELISA试剂盒采用酶联免疫分析检测法可快速、准确地测定植物。多种简便、可靠、精准、稳定性好的生化检测试剂盒和ELISA检测试剂盒。
     
      在植物ELISA试剂盒实验中,选择好各项ELISA实验条件是很重要的,其中包括:
      (1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
     
      (2)包被抗体的选择:将抗体吸附在固相载体表面时,要求纯度要好。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值而蛋白量少的浓度。
     
      (3)酶标记抗体工作浓度的选择:先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其它条件或采取“方阵法”在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
     
    (4)酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。 
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