神经生长因子（NGF）对交感神经和感觉神经元系统的发育和维持至关重要。NGF已被证实是一种复合物，由名为α、β和γ亚基的三种多肽组成。其中，亚基，β-NGF，是一种26.9kDa的蛋白质，含有241个残基，参与神经元的存活和分化。此外，β-NGF还是TRKA受体的配体，而 TRKA 受体是痛觉和温觉神经元分化和发育所的。
标记：
1.将细胞培养基与EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU标记培养基。
2.提前将2×EdU标记培养基预热，然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合，获得1×EdU溶液。
【注】：
①不建议替换全部培养基，这样可能会影响细胞增殖的速度。
②配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜。
3.孵育细胞2h，弃培养基。
【注】：
①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。
②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2h的孵育时间。
4.以1xPBS清洗细胞两次，每次5min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。
【注】：
对于贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。
实验步骤：
1.将细胞以104-105个细胞/孔的密度接种在96孔板中，加入100μL培养基，含或不含待测化合物。在CO2培养箱中在37℃下培养细胞24小时。
2.向板中加入10μL不同浓度的待测物质。
3.在培养箱中将培养板培养适当时间（如6、12、24或48小时）。
4.向板的每个孔中加入10μL CCK-8溶液。小心不要将气泡引入孔中。
5.将平板在培养箱中孵育1-4小时。
6.在读板之前，在定轨振荡器上轻轻混匀。
7.使用酶标仪测量450nm处的吸光度。
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