细胞株是指通过原代培养后成功传代并具有稳定生长特性的细胞群体,通常来源于特定组织或个体,具备无限增殖能力或有限传代能力,是生物医学研究、药物开发和细胞治疗中的核心工具。
生物性污染风险:
支原体污染:
特点:无细胞壁、体积小(0.2-0.3μm),能穿透滤膜,常规显微镜下不可见。
影响:改变细胞代谢、抑制增殖、干扰基因表达,长期存在可导致实验数据失真。
来源:操作人员呼气、未灭菌耗材、血清污染或邻近污染细胞扩散。
防控:每月定期检测(PCR法或荧光染色);新引入细胞株必须隔离并检测。
细菌与真菌污染:
表现:培养基变浑、变色(发黄)、出现絮状物或漂浮颗粒。
来源:超净台滤网老化、操作不规范、培养基灭菌不彻底、手套/移液器交叉使用等。
防控:使用前对所有试剂和耗材进行无菌检查;操作全程保持无菌环境;避免频繁开启培养箱门。
病毒及其他微生物污染:
虽较少见,但某些病毒可潜伏于细胞内,影响特定实验。
非生物性污染风险:
化学污染:
来自残留洗涤剂、重金属、内毒素或劣质DMSO,可导致细胞应激、贴壁不良或死亡。
防控:使用无酶无内毒素的超纯水配制试剂;DMSO选用细胞级、密封保存。
物理污染:
如冻存管密封不严、液氮渗入导致爆炸风险;或反复冻融造成冰晶损伤细胞膜。
防控:冻存管拧紧但不过力;转移至液氮前放入专用密封盒;避免多次冻融。