细胞传代培养是指当原代培养的细胞增殖至接触抑制、营养耗竭时，将其分散后按比例转移至新培养容器中，继续维持生长扩增的技术，也叫继代培养，是细胞培养中基础的常规操作之一。
分类：
贴壁细胞传代：采用酶消化法，常用0.25%胰蛋白酶-EDTA混合液处理，使细胞从培养瓶壁脱落。
悬浮细胞传代：可直接采用离心法，1000rpm离心3-5分钟后重悬分装，也可直接吸弃部分上清后吹打传代。
半悬浮细胞传代：贴壁不牢固，可直接吹打使细胞脱落完成传代。
细胞传代培养操作步骤如下：
（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。
（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。
（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的，一般应覆盖整个培养瓶底。
（4）把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化，2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察，当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时，再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，然后立即加入2倍量的培养液中止消化，使用吸头轻轻吹打，混合均匀，以防消化过度。
（5）吸出所有细胞悬液至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）弃上清，加入适量培养液重悬细胞，轻轻吹打混匀，使细胞均匀分散。
（7）用吸头吸取适量细胞悬液，以适宜的密度接种于新的培养瓶中，补足培养液，摇匀，放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间，甚至进行细胞冻存。
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