巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)是一种19.02kDa的造血生长因子,含有162个氨基酸残基。该蛋白的活性:形式为同源二聚体,由成骨细胞分泌。M-CSF可控制单核细胞、巨噬细f胞和骨髓祖细胞的生成、分化和功能。M-CSF能够通过结合其受体CSF-1R激活CSF-1信号通路。
标记:
1.将细胞培养基与EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU标记培养基。
2.提前将2×EdU标记培养基预热,然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合,获得1×EdU溶液。
【注】:
①不建议替换全部培养基,这样可能会影响细胞增殖的速度。
②配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜。
3.孵育细胞2h,弃培养基。
【注】:
①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。
②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。
4.以1xPBS清洗细胞两次,每次5min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。
【注】:对于贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。
应用场景:
基础免疫研究:用于体外诱导小鼠骨髓细胞分化为成熟巨噬细胞,构建原代巨噬细胞培养体系,是免疫学机制研究的核心工具试剂。
药物研发筛选:作为细胞活性因子,用于构建巨噬细胞相关的药物筛选模型,评估抗炎、免疫调节类候选药物的作用效果。
动物实验研究:体内注射用于调控小鼠体内巨噬细胞数量与功能,构建免疫相关疾病动物模型,开展体内药效学验证。
细胞工程应用:配合GM-CSF等其他因子,用于体外大规模扩增小鼠巨噬细胞、树突状细胞,为细胞治疗相关研究提供足量种子细胞。
产品特性:
高生物活性:重组表达产物与天然小鼠M-CSF活性高度一致,可在无血清培养体系中有效刺激骨髓细胞增殖。
高特异性:抗重组mGM-CSF的抗体可同时中和天然与重组蛋白的生物活性,无交叉反应,特异性远高于动物源提取的天然因子。
批次稳定性好:重组工程化表达体系可实现大规模稳定生产,批次间活性差异小于10%,避免天然提取产物的批次波动问题。