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    PCR检测试剂盒在整个检测过程中的注意事项

    点击次数:596次  更新时间:2020-03-24
       PCR检测试剂盒采用一步法实时荧光反转录聚合酶链式反应(One-StepRealTimeRT-PCR),结合Taqman技术,对特异核酸进行定性或定量检测。用于对AIV进行检测,有助于对AIV的实验室诊断、监测和流行病调查。
      结果成立原则
      阳性对照:CT值<30并有明显的扩增曲线。
      阴性对照:无CT值或者CT值>37,线性为直线或者轻微斜线,无明显扩增曲线。
      以上要求需同时满足,否则本次实验无效,需要重新进行。
     
      PCR检测试剂盒在整个检测过程中的注意事项:
      1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
     
      2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
     
      3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
     
      4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
     
      5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
     
      6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
     
      7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
     
      8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
     
      9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
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