维生素CELISA试剂盒利用的夹心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗体。之后加入的液态抗体可以结合到抗原分子的一个抗原决定簇上，而抗原分子可在温育期内结合到固相抗体上。样品中的抗原与酶标二抗一起在微孔内温育，此酶标二抗可结合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成正比。样品的结果可直接从标准曲线上读取。
维生素CELISA试剂盒的精密度和准确度
精密度
试剂的瓶间差异、批内精密度和批间差异三组测定的平均值之间应无显著差异，否则，试剂盒的均一性不符合要求：
1.瓶间差异：同一试剂盒，取10瓶试剂复溶，测定同一样品的含量，求平均值、标准差、变异系数。
2.批内精密度：同一样品用同一瓶试剂测定10次，求平均值、标准差、变异系数。
3.批间差异：同一样品，用不同批号的10瓶试剂测定，求平均值、标准差、变异系数。
准确度
通常以回收率、定值血清的靶值范围、对照试验及干扰试验的结果来分析判断：
1.回收试验回收率越接近100，准确率越高，一般以100±5%为合格。
2.定值血清的测定对于某些无法准确加入标准物的试剂盒，可用低、中、高浓度的定值血清进行测定，测得值符合定值血清的靶值范围(±2S)为合格。
3.对照试验将被检试剂盒与*的参考方法同时测定若干样本，计算两组结果的相关系数和直线回归方程。
4.非特异性与干扰试验对维生素C、黄疸、溶血、乳糜等因素的耐受程度，干扰值越小越好。
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