小鼠脂蛋白α（Lp-α）ELISA试剂盒采用固相夹心法原理，其工作流程可分为五个核心阶段：
固相抗体包被
将纯化的大鼠Lp-α特异性抗体通过物理吸附作用固定在酶标板微孔表面，形成固相捕获抗体层。这一步骤通常在4℃过夜完成，确保抗体充分结合。
抗原-抗体结合
加入待测样本或标准品后，样本中的Lp-α抗原与固相抗体发生特异性结合，形成"抗体-抗原"复合物。未结合的游离物质通过洗涤步骤去除。
酶标抗体识别
加入HRP标记的第二抗体（酶标抗体），该抗体与Lp-α抗原的另一表位结合，完成"抗体-抗原-酶标抗体"夹心结构构建。
显色反应检测
加入TMB底物后，HRP酶催化产生蓝色产物，酸性终止液使颜色转为黄色。450nm波长下测定的吸光度与抗原浓度呈正相关。
定量分析
通过标准曲线（通常为4-5个浓度梯度）计算样本中Lp-α的摩尔浓度，检测灵敏度可达pg/ml级别。
该方法的关键优势在于双重抗体识别机制，既保证了检测特异性（通过两个独立表位识别），又显著提高了灵敏度。实验过程中需严格控制洗涤步骤（推荐使用自动洗板机）和温育时间（各步骤60-120分钟），以确保检测结果的可靠性。
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